Головна
Не працює
Віруси ентеральних гепатитів і мікробіологія. Мікробіологія та шляхи передачі вірусу гепатиту В. Діагностика захворювання. Контактно-побутовий шлях зараження

Віруси ентеральних гепатитів і мікробіологія. Мікробіологія та шляхи передачі вірусу гепатиту В. Діагностика захворювання. Контактно-побутовий шлях зараження

Вперше частинки вірусу гепатиту В були виявлені Д. Дейном у 1970 р. і згодом названі частинками Дейна. Структура та хімічний склад. Віріони, або частинки Дейна, мають сферичну форму діаметром 42 нм. Серцевина віріона - нуклеокапсид у формі ікосаедра - складається з 180 капсомерів. Зовні він оточений липосодержащей зовнішньої оболонкою. До складу віріону входять ДНК, білки, ферменти ліпіди та вуглеводи. Структура геному HBV незвичайна. Його довжина є непостійною і становить 15-60% довгого ланцюга. Кільцева молекула ДНК може набувати лінійної форми. В ізольованому вигляді вона не має інфекційних властивостей. У складі вірусного геному виявлено близько 6 генів, які контролюють утворення антигенів, структурних білків і не менше двох ферментів (ДНК полімеразу, протеїнкіназу).

Антигени

У складі вірусу гепатиту В виявлено 4 антигени: HBs, HBc, Нве та НВх. HBs-антиген (раніше називався австралійським антигеном) являє собою глікопротеїн з ліпідним компонентом, який міститься у зовнішній оболонці віріона. У його складі виявлено два поліпептидні фрагменти. Один із них (preS2) є поліглобуліновим рецептором, відповідальним за адсорбцію вірусу на аналогічних рецепторах гепатоцитів. Він зв'язується із сироватковим альбуміном, який при полімеризації перетворюється на поліальбумін. Таким чином, у складі зовнішньої оболонки вірусу гепатиту В є ті ж поліальбуміни, що містяться в сироватці крові людини. Другий фрагмент (preS1) має виражені імуногенні властивості. Цей пептид, отриманий генноінженерними методами, може бути використаний для приготування вакцини. HBs-антиген виявляється в крові. НВс-антиген є нуклеопротеїном. Він міститься в серцевині віріонів, що знаходяться в ядрах гепатоцитів і не надходить у кров. Можливо, він має відношення до ракової трансформації гепатоцитів. В організмі хворих на гепатит В синтезуються антитіла до трьох антигенів HBs, HBc, НВе.

Репродукція

Вірус гепатиту В не репродукується у культурах клітин та курячих ембріонів. Реплікація та транскрипція вірусного геному відбувається у ядрах гепатоцитів. При цьому короткий ланцюг у кільцевій молекулі ДНК добудовується довгим ланцюгом за допомогою вірусної ДНК-полімерази, після чого починається реплікація обох ниток. Незвичайним є можливість транскрибування з вірусної ДНК молекули РНК, що виконує функцію матриці синтезу вірусної ДНК шляхом зворотної транскрипції. Це відбувається за участю вірусіндукованої зворотної транскриптази. Даний процес, зрозумілий у випадку РНК-вірусів, які за допомогою зворотної транскрипції отримують можливість вбудувати свій геном (ДНК-транскрипт) в хромосому клітини господаря, залишається загадковим для ДНК-вірусу гепатиту В. Одночасно з вірусного генома транслюється інформація для синтезу на рибосомах гепатоцитів НВс- та HBs-антигенів, вірусоспецифічних ферментів та капсидних білків Синтезовані нитки ДНК збираються до нуклеокапсидів. При виході з клітини вони набувають зовнішньої оболонки з HBs- і НВс-антигенами.

Патогенез та імунітет

Оскільки вхідними воротами інфекції при гепатиті є кровоносні судини, вірус відразу ж потрапляє в кров, з якої розноситься по всьому організму, фіксуючись насамперед на гепатоцитах. Однак репродукція вірусу не супроводжується цитолізом цих клітин. Це свідчить про те, що вірус гепатиту В не має прямої цитопатичної дії, а патологічний процес у печінці виникає не з моменту впровадження збудника в гепатоцити, а тільки після розпізнавання імуноцитами його антигенів на зовнішній мембрані цих клітин. Таким чином, ураження клітин печінки при гепатиті В є імунообумовленим. Різноманітність патогенетичних форм даного захворювання (гострі, підгострі, хронічні або персистуючі) визначається антигенами збудника та характером його взаємодії з гепатоцитами, в результаті якого розвивається продуктивна або інтегративна інфекція, з одного боку, форм імунної відповіді та вираженістю імунопатологічних процесів – з іншого. При гострих формах гепатиту В пригнічується активність Т-хелперів, при хронічних – до процесу залучаються Т-супресори. При стабільному придушенні клонів Т-супресорів формуються умови для розвитку аутоімунних реакцій, спрямованих проти власних клітинних антигенів і перш за все печінкового ліпопротеїну. При інгібуванні Т-хелперів порушується розпізнавання вірусних антигенів, що зрештою призводить до придушення антитілоутворення.

Гепатит В

Вірус гепатиту В (ВГВ) належить до сімейства Hevadnaviridae. Він є сферичною формою складноорганізованих вірус діаметром до 42 нм. Зовні вірус покритої білково-ліпідною суперкапсидною оболонкою. Капсід побудований за кубічним типом симетрії, складається з 180 капсомерів. ДНК має форму кільця, один із ланцюгів якої дефектний. В процесі репродукції вірусів ДНК-полімераза добудовує дефектну ДНК. Вірус гепатиту має кілька антигенів. Поверхневий антиген (HBsAg) є високостійким до дії фізико-хімічних факторів. Його виявляють практично у всіх біологічних рідинах хворих. Серцевий антиген (HBcAg) входить до складу нуклеокапсиду вірусу гепатиту В. Цей антиген є присутнім у ядрах гепатоцитів хворих людей. HBeAg миститься між HBcAgi HBsAg. Його можна виявити у цитоплазмі та ядрах гепатоцитів людей, інфікованих вірусом. Деякі дослідники висловлюють припущення про існування ще одного антигену - HBxAg, який може стосуватися ракової трансформації гепатоцитів. Віруси гепатиту В мають високу резистентність до дії різноманітних факторів зовнішнього середовища. Зокрема, вони витримують кип'ятіння протягом 15-20 хв, а при 60°С – до кількох годин. Автоклавування при 121 ° С інактивує вірус протягом ЗО хв, сухий жар (160 ° С) - за 60 хв, а при 180 ° С - за 40 хв. У зв'язку з тим, що вірус гепатиту В не розмножується ні в культурах тканин, ні в курячих ембріонах, можна виділити два основні напрямки лабораторних досліджень - серологічну та експрес-діагностичну.

Експрес-діагностика

Експрес-діагностика спрямована на виявлення в крові хворого на антигени вірусу гепатиту - HBsAg, HBeAg і HBeAg. У рутинній лабораторній практиці найчастіше визначають HBsAg. Він з'являється в крові хворих ще протягом інкубаційного періоду, за кілька тижнів до появи основних клінічних симптомів хвороби та підвищення активності печінкових ферментів трансаміназ. Як правило, у сироватці крові поверхневих антигенів у кілька сотень чи тисяч разів більше, ніж самих вірусів. Розроблено кілька методів, що дозволяють виявити у сироватці хворої людини або вірусоносія ці антигени: реакція преципітації в гелі, реакція зворотної непрямої гемаглютинації, зустрічний імунолектрофорез, РІА, ІФА. Останні дві реакції за своєю чутливістю значно перевищують попередні. HBeAg можна виявити за допомогою ІФА, РНГА, РНЗГА, РСК, a HBeAg - ІФА, РІА та інших.

Серологічні дослідження

З цією метою досліджують сироватку крові хворих на наявність антитіл проти різних антигенів вірусів гепатиту В. Сучасні серологічні методи дозволяють визначити в крові антитіла проти різних вірусних антигенів: анти-HBs, анти-НВс та анти-НВе. РІА. Однак антитіла проти HBSsAg можна знати ще за допомогою реакції преципітації в гелі, реакції не-HBsAg гемагглютинації подібне. важливим з діагностичної точки зору, оскільки дозволяє стежити за динамікою хвороби та прогнозувати її перебіг. Ці антигени та антитіла названі маркерами вірусного гепатиту В. До них, таким чином, відносяться в першу чергу HBsAg, HBcAg, HBeAg, анти-HBs, анти-НВе, анти-HBs IgM та сумарний пул антитіл проти цього антигену. приблизно через 3-5 тижнів після зараження. Про одужання після гострого гепатиту В свідчить повне зникнення HBsAg та поява антитіл (анти-HBs) у сироватці крові. Останні можуть зберігатися протягом усього життя. Однак антитіла проти поверхневого HBsAg з'являються не відразу після його зникнення, а через деякий проміжок часу (від 2-4 тижнів до 1 року). У цей період маркером гепатиту виступають антитіла до HBcAg та, зокрема, IgM, а сам цей період називається корівським вікном (від англ. Core – серцевина). Ці антитіла існують у сироватці не тільки при гострій формі гепатиту, але й при хронічній. Не менш важливим маркером є анти-НВС антитіла, які відносяться до класу IgG. Ці імуноглобуліни вторинної імунної відповіді можуть бути знайдені в крові людини протягом усього життя. Його вважають маркером реплікації ДНК вірусу гепатиту В або антигеном інфекційності, тому що знаходять його найчастіше разом з ДНК-полімеразою та ДНК вірусу гепатиту В. Хоча концентрація цих антигенів у крові нижча, ніж HBsAg, вони є майже у всіх хворих. При гострому гепатиті У HBeAg можна виявити у крові протягом 6-8 тижнів. Пізніше там накопичуються антитіла проти них (анти-НВе), які самі зникають. Якщо при відповідних дослідженнях у хворого виявляють HBeAg після 9-10 тижнів від початку захворювання, це може розглядатися як свідчення хронізації процесу. У таких випадках цей ензимний антиген циркулює в крові протягом кількох років. S 1 та npe-S2. Вважають, що наявність npe-S2 антигену в крові свідчить про її високі інфекційні властивості. У той же час у хворих, які одужали, у крові присутні антитіла до цього антигену. Пре-S 1 антигени також свідчать про інфекційність крові, реплікацію вірусів в організмі, а також досить високий ризик можливості вертикальної передачі вірусу гепатиту В від матері до дитини.

ГБОУ ВПО "Уральський державний медичний університет" Міністерства охорони здоров'я Російської Федерації Кафедра мікробіології, вірусології та імунології

Методичні вказівки до практичних занять для студентів

ООП спеціальності 060301.65 Фармація Дисципліна С2.Б.11 Мікробіологія

1. Тема: Збудники вірусних гепатитів.

2. Цілі заняття: Вивчити зі студентами будову збудників вірусних гепатитів, патогенез вірусних гепатитів, методи діагностики, профілактики та лікування вірусних гепатитів.

3. Завдання заняття:

3.1. Вивчення будови та репродукції збудників вірусних гепатитів.

3.2. Вивчення патогенезу, діагностики, профілактики та лікування вірусних гепатитів.

3.3. Виконання самостійної роботи.

компетенції

Здатність та

Структуру

Застосовувати

готовність

збудників

елементи методик

біологічним

аналізувати

вірусних

лабораторних

понятійним

соціально значущі

гепатитів

досліджень

апаратом

проблеми та процеси,

використовувати на

практиці методи

гуманітарних,

природничих,

медико-біологічних

та клінічних наук у

різних видах

професійної та

соціальної

діяльності

Здатність та

Принципи

Користуватися

Користуватися

готовність до участі

діагностики,

інструментарієм

інструментарієм

у постановці наукових

профілактики та

при проведенні

при проведенні

завдань та їх

лікування вірусних

діагностичних

діагностичних

експериментальної

гепатитів

досліджень

маніпуляцій

реалізації

4. Тривалість заняття в академічному годиннику: 3:00.

5. Контрольні питання на тему:

5.1. Будова та репродукція вірусу гепатиту А.

5.2. Патогенез та клініка гепатиту А.

5.3. Діагностика гепатиту А.

5.4. Профілактика та лікування гепатиту А.

5.5. Будова та репродукція вірусу гепатиту Ст.

5.6. Патогенез та клініка гепатиту В.

5.7. Діагностика гепатиту Ст.

5.8. Профілактика та лікування гепатиту В.

5.9. Будова та репродукція вірусу гепатиту С.

5.10. Патогенез та клініка гепатиту С.

5.11. Діагностика гепатиту С.

5.12. Профілактика та лікування гепатиту С.

6. Завдання та методичні вказівки до їх виконання.

На занятті студенту необхідно:

6.1. Відповісти на запитання викладача.

6.2. Взяти участь в обговоренні питань, що вивчаються.

6.3. Виконати самостійну роботу.

Теоретична довідка Збудники вірусних гепатитів:

- вірус гепатиту А(НАV);

- вірус гепатиту В (HBV);

- вірус гепатиту С(HCV);

- вірус гепатиту D(HDV);

- вірус гепатиту E(HEV);

- вірус гепатиту F(HFV);

- вірус гепатиту G(HGV).

Вірусні гепатити поділяються на 2 групи:

- ентеральні гепатити (гепатити А та Е);

- парентеральні гепатити (гепатити, С, D, F, G).

I. Вірус гепатиту А

Гепатит А (хвороба Боткіна) – це інфекційне захворювання,

характеризується ураженням печінки. Хвороба проявляється лихоманкою, інтоксикацією, жовтяницею, схильністю до епідемічного поширення. Антропоноз. Вірус вперше виділив С. Фейнстоун (1973).

Таксономія. Вірус гепатиту А включений до роду Hepatovirus сімейства

Picornaviridae.

Морфологія. Віріони сферичної форми розміром 25-30 нм. Геном утворює несегментована молекула плюс-РНК, оточена капсидом. Геном має білок VPg. Нуклеокапсид кубічної симетрії. Суперкапсид відсутня.

Репродукція. Вірус вивільняється із клітин шляхом екзоцитозу.

Епідеміологія. Резервуар збудника та джерело інфекції- хвора людина. Хворий виділяє збудник з фекаліями з другої половини інкубаційного періоду (протягом 2-3 тижнів до початку жовтяничного періоду) та протягом перших 3-5 діб жовтяничного періоду. Передача збудника відбувається фекально-оральнимшляхом (через воду, харчові продукти, брудні руки, різноманітні предмети побуту). Пік захворюваності посідає пізню осінь

чи зиму. Переважно хворіють діти віком 4-15 років. Можливі водні та харчові епідемічні спалахи. Гепатит А поширений повсюдно, але особливо у місцях із дефіцитом води, поганими системами каналізації та водопостачання, і навіть за низькому гігієнічному рівні життя населення. Після перенесеного захворювання формується стійка несприйнятливість повторного зараження.

Стійкість. Вірус гепатиту А стійкий у довкіллі, при 21°С зберігається кілька тижнів; при 60 ° С зберігається протягом 12 годин, при кип'ятінні гине протягом 5 хвилин. Вірус добре переносить низькі температури, стійкий до хлору, завдяки чому зберігається у очищеній питній воді.

Патогенез уражень. Потрапляючи в організм людини з водою або їжею, вірус гепатиту А розмножується в епітелії слизової оболонки тонкої кишки та регіонарних лімфоїдних тканин. Потім настає фаза короткочасної вірусемії. Максимальна концентрація вірусу в крові виникає наприкінці інкубаційного періоду та в переджовтяничний період. У цей час збудник також виділяється із фекаліями. Основна мета для цитопатогенного впливу – гепатоцити ( гепатотропізм вірусу), куди вірус надходить через портальну вену. Репродукція вірусу в цитоплазмі гепатоцитів призводить до загибелі клітин внаслідок імунопатологічних механізмів. Цитопатичний ефект посилюють N-клітини, активовані інтерфероном, синтез якого індукується вірусом.

Клініка. Інкубаційний період становить від 15 до 50 днів, частіше за місяць. Початок гострий: підвищення температури та явища з боку шлунково-кишкового тракту (нудота, блювання). На 5-7 день розвивається жовтяниця склер, шкірних покривів. Клінічний перебіг захворювання в основному легкий, без особливих ускладнень, у дітей до 5 років найчастіше безсимптомний. Тривалість захворювання 2-3 тижні. Хронічні форми не розвиваються.

Імунітет. Після перенесеного захворювання формується стійкий довічний імунітет. На початку захворювання у крові з'являються IgM, які зберігаються в організмі протягом 4-6 місяців та мають діагностичне значення. Пізніше з'являються IgG. Крім гуморального імунітету, у кишечнику розвивається і місцевий імунітет. Діти першого року життя виявляються антитіла, отримані через плаценту від матері.

Принципи мікробіологічної діагностики Матеріал для дослідження - Сироватка крові та випорожнення. Маркери реплікації вірусу - антитіла (IgM та IgG) до антигенів вірусу гепатиту А та вірусна РНК. Зазначені маркери визначають уІФА та РІА.

Лікування. Засоби специфічної противірусної хіміотерапії відсутні, лікування симптоматичне.

Профілактика. Розроблений сироватковий імуноглобулін

запобігає розвитку захворювання протягом 3 місяців, а також значно пом'якшує перебіг захворювання. Його застосовують за епідпоказаннями для пасивної імунізації осіб, що прямують до ендемічних районів. Для активної імунопрофілактики вірусного гепатиту А використовують інактивовану культуральну концентровану вакцину. Розроблено також рекомбінантну генно-інженернавакцина.

Загальні профілактичні заходи спрямовані на покращення санітарної обстановки, включають дотримання карантинних заходів, покращення умов водопостачання та підвищення гігієнічної культури населення.

ІІ. Вірус гепатиту В

Гепатит В - інфекційне захворювання з парентеральним механізмом передачі, що клінічно і морфологічно характеризується ураженням печінки з можливістю розвитку гострої печінкової недостатності, хронічного гепатиту, цирозу печінки та первинного раку печінки (гепатоцелюлярної карциноми). Збудник вперше виявили Д. Дейн та співавт. 1970 р. (частка Дейна).

Таксономія. Вірус гепатиту В включений до складу роду Orthohepadnavirus

сімейства Hepadnaviridae.

Морфологія. Віріони вірусу гепатиту У сферичній формі 42-47 нм у діаметрі, мають суперкапсид. Серцевина віріона має кубічний тип симетрії і складається з 180 білкових частинок (серцевий НВс-антиген). Усередині серцевини знаходиться ДНК, фермент ДНК-полімераза та НВе-антиген. Поверхнева оболонка, що містить ліпід, включає HBs-антиген. Геном вірусу гепатиту В представлений двониткової кільцевої ДНК, одна нитка якої коротше (неповна плюс-нитка) іншої нитки. До складу серцевини також входить ДНК-залежна ДНК-полімераза, пов'язана з мінус-ланцюгом ДНК.

Репродукція. Після адсорбції всередину клітини проникає серцевина вірусу. Потім неповна нитка ДНК добудовується; формується повна двониткова кільцева ДНК і дозріває геном потрапляє в ядро ​​клітини. Тут клітинна ДНК-залежна РНК-полімераза синтезує різні іРНК (для синтезу вірусних білків) та РНК-прегеном – матрицю для реплікації геному вірусу. Далі іРНК переміщуються до цитоплазми і транслюються з утворенням білків вірусу. Білки серцевини вірусу збираються довкола прегенома. Під дією РНК-залежної ДНК-полімерази вірусу на матриці прегенома синтезується мінус-нитка ДНК, на якій утворюється плюс-нитка ДНК. Оболонка віріону формується на НВs-вмісних мембранах ендоплазматичної мережі або апарату Гольджі. Віріон виходить із клітини екзоцитозом.

Стійкість. Вірус гепатиту В відрізняється високою стійкістю до факторів довкілля. Температуру мінус 20 ° С витримує понад 10 років. При 100°З зберігає життєздатність протягом 5 хвилин. Вірус стійкий до тривалого впливу кислого середовища, УФ-випромінювання, дії спирту, фенолу. Чутливий до дії формаліну, ефіру, хлороформу.

Епідеміологія . Основний резервуар таджерело збудника -

інфікована людина (вірусоносії, хворі на гостру та хронічну форми). Основні шляхи передачі вірусу гепатиту В - ін'єкційний, гемотрансфузійний та статевий. Також показано можливість вертикальної передачі вірусу гепатиту від матері до плода. У інфікованих осіб вірус знаходиться у всіх біологічних рідинах – крові, слині, сечі, спермі, синовіальній рідині, цереброспінальній рідині, грудному молоці. У крові вірус з'являється за 2-3 місяці до симптомів ураження печінки і зберігається до 5 років після клінічного одужання.

Основні групи ризику – медичні працівники; особи, які отримують гемотрансфузію або препарати крові; наркомани, які вводять наркотики внутрішньовенно; хворі на гемофілію; особи, які перебувають на гемодіалізі; діти матерів-носіїв HBsAg; статеві партнери носіїв вірусу

Антигенна структура.

HBsAg. Перший ідентифікований антиген вірусу гепатиту; вперше його виділив Б. Блюмберг (1963) із крові австралійського аборигену, тому цей антиген також називають австралійським. HBsAg з'являється у крові через 1,5 місяці після інфікування; постійно циркулює у сироватці інфікованих осіб. HBsAg виявляється у крові у складі віріонів, а й у вигляді самостійних фрагментів.

HBcAg. Серцевий HBcAg виявляють тільки в серцевині частинок Дейна, у вільному стані в крові цей антиген не виявляється. Антиген маркує реплікацію вірусу гепатоцитах. Може бути виявлений лише при морфологічному дослідженні біоптатів чи аутопсійного матеріалу печінки. У крові у вільному вигляді його не визначають.

HBeAg. З'являється у сироватці в інкубаційному періоді, одразу після появи HBsAg. HBeAg можна розцінювати як найчутливіший діагностичний показник активної інфекції. Виявлення HBeAg у пацієнтів із хронічним гепатитом вказує на активацію процесу, що становить високу епідемічну небезпеку.

ДНК у сироватці одночасно з іншими антигенами вірусу. Зникає з кровотоку на початку другого тижня гострого захворювання. Тривале персистування – свідчення хронічної інфекції. У діагностиці гострого гепатиту визначення ДНК використовують рідко.

Патогенез. Вірус гепатиту В гематогенно заноситься до печінки та розмножується в гепатоцитах. Після проникнення вірусу в гепатоцит можливий розвиток двох типів вірусної інфекції – інтегративної та продуктивної.

Інтегративна інфекціясупроводжується інтеграцією вірусної ДНК у хромосому гепатоциту з утворенням провірусу. При цьому синтезується HBsантиген. Клінічно це проявляється вірусоносійством, розвитком первинного раку печінки.

Продуктивна інфекціясупроводжується формуванням нових вірусних часток. Клінічно це проявляється активним інфекційним процесом у вигляді гострого чи хронічного гепатиту. Маркером цього є поява у крові анти-HBс-IgM антитіл. Руйнування гепатоцитів опосередковується CD8 Т-лімфоцитами, які взаємодіють із НВс-антигеном на поверхні заражених гепатоцитів. У другій половині інкубаційного періоду (40-180 діб) вірус виділяють із крові, сперми, сечі, фекалій та секрету носоглотки.

Клініка. Інкубаційний період – 3-6 місяців. При інтегративній інфекції спостерігається вірусоносійство без прояву клінічних симптомів. При продуктивній інфекції ураження печінки супроводжується розвитком жовтяниці. Можливі і безжовтяничні форми.

Принципи мікробіологічної діагностики . Маркери реплікації вірусу гепатиту В - HBeAg, антитіла (IgM) до HBcAg, ДНК вірусу та вірусна ДНКполімераза. Для виявлення HBsAg та HBeAg застосовують ІФА та РНГА;

дослідження доповнюють виявленням ДНК вірусу гепатиту В та вірусної ДНКполімерази. Вірусспецифічні антитіла до HBsAg, HBcAg, HBeAg визначають в ІФА та РНГА. На наявність “свіжої” інфекції вказують високі титри HBsAg та IgM до HBsAg та HBcAg. У пацієнтів з гепатитом, що клінічно проявляється, титр HBsAg спочатку зростає, а потім знижується. Антитіла до HBsAg можна виявити лише за кілька тижнів, що пояснюють їх активним зв'язуванням в імунні комплекси. Протягом цього періоду можна виявити лише антитіла до HBcAg.

Антитіла до HBcAg. Важливим є діагностичний маркер інфікування, особливо при негативних результатах виявлення HBsAg:

- IgM до HBcAg. Один із найбільш ранніх сироваткових маркерів вірусного гепатиту В. При хронічному гепатиті маркують реплікацію вірусу та активність процесу в печінці;

- IgG до HBcAg. Зберігаються багато років. Свідчать про наявну або раніше перенесену інфекцію.

Антитіла до HBeAg. Серологічний маркер інтеграції вірусу. У комплексі з IgG НВсАg та НВsАg свідчать про повне завершення інфекційного процесу.

Антитіла до НВsАg. Свідчать про завершення вірусної інфекції. Лікування. Засоби специфічної терапії відсутні, лікування в

здебільшого симптоматичне. Застосовують інгібітори ДНК-полімерази (ламівудін), α-інтерферон, віферон, аміксин.

Імунопрофілактика. Пасивна імунізація специфічним Ig (НВІg) показана особам, які контактували з інфікованим матеріалом і носіями НВsАg (включаючи статевих партнерів та дітей, що народилися від НВsАg-позитивних матерів). Для активної імунізації розроблено два типи вакцин. Перші готують із плазми пацієнтів, що містить антиген вірусу гепатиту В. Другу групу складають рекомбінантні вакцини(Recombivax, Engerix), отримані методом генної інженерії на культурах пекарських дріжджів (Saccharomyces cerevisiae) і містять HBs-антиген.

ІІІ. Вірус гепатиту С

Гепатит С - це антропонозне вірусне захворювання з парентеральним механізмом зараження, що протікає у вигляді посттрансфузійного гепатиту з переважанням безжовтяничних і легких форм і схильне до хронізації.

Вірус гепатиту С відноситься до сімейства Flaviviridae (лат. flavus – жовтий) роду Hepacivirus (лат. hepar – печінка). Вид – вірус гепатиту С, Hepatitis C virus (HCV).

Віріони вірусу гепатиту С мають сферичну форму розміром 55-65 нм. Геном представлений лінійною плюс-РНК. Зовні віріон оточений ліпідним суперкапсидом із білковими виступами. Репродукція вірусу відбувається у цитоплазмі інфікованої клітини.

Резистентність. Вірус у зовнішньому середовищі нестійкий.

Епідеміологія. Джерело інфекції - Інфікована людина.

Механізм передачі- Парентеральний. Шляхи передачі – при переливанні крові, трансплацентарно, статевим шляхом.

Клініка. Розрізняють такі періоди захворювання: 1. Інкубаційний період – 6-8 тижнів.

2. Переджовтяничний період – 1-2 тижні.

3. Розпал захворювання – розвиток жовтяниці, тривалість – 2-3 неділі. Відзначається підвищення рівня білірубіну, АЛТ, інтоксикація, гепато- та спленомегалія. Захворювання протікає як гострого чи хронічного гепатиту. Часто зустрічаються безжовтяничні форми.

Діагностика здійснюється за допомогою ПЛР (вірусний геном визначається вже в інкубаційному періоді). Антитіла (анти-HCV) виявляються при імуноферментному аналізі від кількох днів до кількох тижнів після початку захворювання.

Після обговоренняТеоретичні питання викладач пояснює порядок проведення самостійної роботи.

Самостійна робота:

1. Постановка досвіду виявлення IgM до HAV в сироватках крові хворих на гепатит. Реакцію ставлять у мікропланшетах у верхньому ряду із сироватками №№1, 2, 3, 4 (лунки 1, 3, 5, 7), позитивною контрольною сироваткою “K+HAV” (лунка 9), негативною контрольною сироваткою"K-HAV" (лунка 11). За наявності IgM

до HAV у випробуваних сироватках (№№2 і 3) розчин субстрату з безбарвного стає рожевим, як і в лунці №9 з позитивною сироваткою контрольної. У лунці №11 з негативною контрольною сироваткою розчин не змінює забарвлення.

2. Постановка ІФА для виявлення HBsAg у сироватках крові хворих на гепатит. Реакцію ставлять у мікропланшетах у верхньому ряду із сироватками хворих №№5, 6, 7, 8 (лунки 1, 3, 5, 7), позитивною контрольною сироваткою “K+HBs” (лунка 9) та негативною контрольною сироваткою"K-HBs" (лунка 11). За наявності HBsAg у випробуваних сироватках розчин субстрату стає рожевим, як і в лунці №9 з позитивною контрольною сироваткою. У лунці №11 із негативною контрольною сироваткою колір розчину не змінюється.

7. Оцінювання знань, умінь, навичок на тему заняття:

Відповіді на запитання та активність на занятті оцінюються за 5-бальною системою.

8. Література для підготовки теми:

8.1. Основна:

1. Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія: підручник для студентів медичних вузів. За ред. А.А. Воробйова. Підручники та навч. посібники для вищої школи Видавництво: Медичне інформаційне агентство, 2012. - 702 с.

2. 2-х т. Том 1: навч. з дисципліни "Мікробіологія, вірусологія та імунологія" для студентів установ вищої. проф. освіти, які навчаються за спеціальностями 060101.65 “Лікув. справа”, 060103.65 “Педіатрія”, 060104.65 “Медико-профілакт. справа” / за ред. В.В. Звєрєва, М.М. Бойченка. - М.: Геотар-Медіа, 2011. - 448 с.: іл.

3. Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія. У 2-х т. Том 2: навч. з дисципліни "Мікробіологія, вірусологія та імунологія" для студентів установ вищої. проф. освіти, які навчаються за спеціальностями 060101.65

“Лікув. справа”, 060103.65 “Педіатрія”, 060104.65 “Медико-профілакт. справа” / за ред. В.В. Звєрєва, М.М. Бойченка. - М.: Геотар-Медіа, 2011. - 480 с.: іл.

8.2. Додаткова:

1. Коротяєв А.І. Медична мікробіологія, імунологія та вірусологія: Підручник для студентів мед. вузів/А.І. Коротяєв, С.А. Бабичів. - 5-те вид., Випр. і

дод. - СПб.: СпецЛіт, 2012. - 759 с.: Іл.

2. Медична мікробіологія: підручник. 4-те вид. Поздєєв О.К. / За ред. В.І. Покровського. - 2010. - 768 с.

Методичні вказівки перероблені та доповнені професором Літусовим Н.В.

Обговорено на засіданні кафедри мікробіології, вірусології та імунології.

Вірус гепатиту А відноситься до сімейства пікорнавірусів, роду ентеровірусів.

Вірус гепатиту А з морфології подібний коїться з іншими представниками роду ентеровірусів. Геном утворює однониткова молекула + РНК; він містить три основні білки. Не має суперкапсидної оболонки.

Антигенна структура: має один вірусспецифічний антиген білкової природи.

Вірус має знижену здатність до репродукції в культурах клітин. Репродукція вірусу не супроводжується цитопатичною дією.

Вірус стійкий до дії фізичних та хімічних факторів.

Основний механізм передачі вірусу гепатиту А – фекально-оральний. Хворий виділяє збудник протягом 2-3 тижнів до початку жовтяничної стадії і 8-10 діб після її закінчення. Вірус патогенний лише для людини.

Вірус гепатиту А потрапляє в організм людини з водою або їжею, репродукується в епітелії слизової оболонки тонкої кишки та регіонарних лімфоїдних тканин. Потім збудник потрапляє в кровотік із розвитком короткочасної вірусемії. Максимальні титри вірусу в крові виявляють наприкінці інкубаційного та переджовтяничного періодів. У цей час збудник виділяється із фекаліями. Основна мета для цитопатогенного впливу – гепатоцити. Репродукція вірусу в їх цитоплазмі призводить до порушення внутрішньоклітинних метаболічних процесів та загибелі клітин. Цитопатичний ефект посилюють імунні механізми, зокрема N-клітини, синтез яких індукується вірусом.

Поразка гепатоцитів супроводжується розвитком жовтяниці та підвищенням рівня трансаміназ. Далі збудник із жовчю потрапляє у просвіт кишечник і виділяється з фекаліями, у яких відзначається висока концентрація вірусу.

Вірус гепатиту А викликає розвиток гострого висококонтагіозного захворювання, яке може протікати субклінічно або давати типові клінічні форми.

Після перенесення клінічно вираженої чи безсимптомної інфекції формується довічний гуморальний імунітет.

Лабораторна діагностика:

1) визначення вмісту жовчних пігментів та амінотрансфераз у сироватці;

2) культивування на лейкоцитарних чи органних культурах;

3) ІФА та метод твердофазного РІА – для виявлення антитіл (IgМ), які з'являються у сироватці крові вже наприкінці інкубаційного періоду та зберігаються протягом 2–3 місяців після одужання. З середини жовтяничного періоду виробляються IgG, що зберігаються довічно;

4) молекулярно-генетичні методи - виявлення РНК-вірусу в ПЛР.

Лікування: засоби специфічної противірусної терапії відсутні, симптоматичне лікування.

Специфічна профілактика: убита вакцина на основі штаму СR 326.

2. Вірус гепатиту В

Належить до сімейства Hepadnaviridae. Це ікосаедральні, оболонкові ДНК-віруси, що викликають гепатити у різних тварин і людини. Геном утворює неповна (з розривом одного ланцюга) кільцева двониткова молекула ДНК. До складу нуклеокапсиду входять праймерний білок та ДНК полімераза, асоційована з ДНК.

Для ефективної реплікації необхідний синтез вірусиндукованої зворотної транскриптази, оскільки вірусна ДНК утворюється на матриці РНК; в динаміці процесу вірусна ДНК інтегрує до ДНК клітини.

Синтез ДНК та складання вірусу здійснюються в цитоплазмі інфікованої клітини. Зрілі популяції виділяються відбрунькування від клітинної мембрани.

Антигенна структура:

1) НВsАг (включає два поліпептидних фрагмента):

а) поліпептид preS1 має виражені імуногенні властивості; одержаний методом генної інженерії поліпептид може використовуватись для приготування вакцинних препаратів;

б) поліпептид preS2 (поліглобуліновий рецептор, що зумовлює адсорбцію на гепатоцитах; здатний взаємодіяти з сироватковим альбуміном, в результаті чого останній перетворюється на поліальбумін);

2) НВcorАг (є нуклеопротеїном, представлений єдиним антигенним типом; його виявляють лише в серцевині вірусу);

3) НВeАг (відщеплюється від НВcorАг внаслідок проходження його через мембрану гепатоцитів).

Зараження відбувається при ін'єкціях інфікованої крові чи препаратів крові; через забруднені медичні інструменти, статевим шляхом та інтранатально, можливе внутрішньоутробне інфікування.

Місце первинної реплікації вірусу невідоме; розмноження у гепатоцитах спостерігають лише через 2 тижні після інфікування. При цьому реплікативний цикл не супроводжується смертю гепатоцитів. У другій половині інкубаційного періоду вірус виділяють із крові, сперми, сечі, фекалій та секрету носоглотки. Патологічний процес починається після розпізнавання вірусіндукованих антигенів на мембранах гепатоцитів імунокомпетентними клітинами, тобто обумовлений імунними механізмами.

Клінічні прояви варіюються від безсимптомної та безжовтяничної форм до тяжкої дегенерації печінки. Течія гепатиту В тяжче, з поступовим початком, тривалим інфекційним циклом, вищим рівнем летальності, ніж при гепатиті А. Можлива хронізація процесу.

Лабораторна діагностика:

1) виявлення вірусних антигенів імунофлюоресцентним методом; матеріал – фекалії, кров та біопсійний матеріал печінки;

2) серологічні дослідження включають визначення антигенів і антитіл за допомогою реагентів - НВsАг, НВeАг; антигенів до НВsАг, НВcorАг, НВeАг та IgM до НВcorАг;

3) визначення ДНК-полімерази.

Лікування: засоби специфічної лікарської терапії відсутні, лікування переважно симптоматичне.

Специфічна профілактика:

1) пасивна імунізація – вводять специфічний імуноглобулін (HBIg);

2) активна імунізація (рекомбінантні вакцини, одержані методом генної інженерії).

Імунізація показана всім групам ризику, включаючи новонароджених.

3. Інші збудники вірусних гепатитів

Вірус гепатиту С - РНК-вірус. Таксономічне становище його в даний час точно не визначено; він близький до сімейства флавівірусів.

Є сферичною частинкою, що складається з нуклеокапсиду, оточеного білково-ліпідною оболонкою. Розмір віріону – 80 нм. РНК має зони, що кодують синтез структурних та неструктурних білків вірусу. Синтез структурних білків кодують З та Е зони РНК, а синтез неструктурних білків вірусу кодують NS-1, NS-2, NS-3, NS-4 та NS-5 зони РНК.

Вірус гепатиту С характеризується антигенною мінливістю, є сім основних варіантів вірусу.

Джерелом інфекції є хворі на гострий і хронічний гепатит С і вірусоносії. Вірус передається парентеральним шляхом, статевим шляхом та від матері плоду (при пери-і постнатальному інфікуванні).

Характерні переважання безжовтяничних форм і частий перехід у хронічну форму захворювання. Вірус є одним із факторів розвитку первинної гепатоцелюлярної карциноми.

Лабораторна діагностика:

1) визначення РНК-вірусу за допомогою ПЛР;

2) визначення антитіл до вірусу в ІФА.

Вірус гепатиту D не належить до жодного з відомих сімейств вірусів тварин. Це сферична частка із середнім діаметром 36 нм. Геном представлений однонитковою, циклічною молекулою РНК, яка утворює паличкоподібну нерозгалужену структуру. У РНК закодовано вірусспецифічний поліпептид – HDAg (власний антиген нуклеокапсиду). Зовнішня оболонка утворює поверхневий антиген.

Реплікація РНК-вірусу гепатиту D відбувається у ядрі зараженого гепатоциту.

Джерела інфекції – хвора людина та вірусоносій. Шлях передачі парентеральний. Вірус гепатиту D не може брати участь у розвитку гепатитної інфекції без одночасної реплікації вірусу гепатиту В. Цей факт визначає дві можливі форми їхньої взаємодії:

1) одночасне інфікування вірусним гепатитом В та D (конверсія);

2) інфікування носія вірусу гепатиту D вірусом гепатиту В (суперінфекція).

При суперінфекції відбувається швидке ураження паренхіми печінки із масивним некрозом.

Діагностика: виявлення антитіл до вірусу ІФА.

Вірус гепатиту Е відноситься до сімейства каліциновірусів. Це РНК-вірус сферичної форми, розміром 20-30 нм. Шляхи передачі – водяний, харчовий, можливий контактний. Джерело інфекції – хворий на гостру або хронічну форму. За клінічною картиною близький до гепатиту А.

Діагностика: виявлення антитіл в ІФА.

Мікробіологія: конспект лекцій Ткаченка Ксенія Вікторівна

2. Вірус гепатиту В

2. Вірус гепатиту В

Належить до сімейства Hepadnaviridae. Це ікосаедральні, оболонкові ДНК-віруси, що викликають гепатити у різних тварин і людини. Геном утворює неповна (з розривом одного ланцюга) кільцева двониткова молекула ДНК. До складу нуклеокапсиду входять праймерний білок та ДНК полімераза, асоційована з ДНК.

Для ефективної реплікації необхідний синтез вірусиндукованої зворотної транскриптази, оскільки вірусна ДНК утворюється на матриці РНК; в динаміці процесу вірусна ДНК інтегрує до ДНК клітини.

Синтез ДНК та складання вірусу здійснюються в цитоплазмі інфікованої клітини. Зрілі популяції виділяються відбрунькування від клітинної мембрани.

Антигенна структура:

1) НВsАг (включає два поліпептидних фрагмента):

а) поліпептид preS1 має виражені імуногенні властивості; одержаний методом генної інженерії поліпептид може використовуватись для приготування вакцинних препаратів;

б) поліпептид preS2 (поліглобуліновий рецептор, що зумовлює адсорбцію на гепатоцитах; здатний взаємодіяти з сироватковим альбуміном, в результаті чого останній перетворюється на поліальбумін);

2) НВcorАг (є нуклеопротеїном, представлений єдиним антигенним типом; його виявляють лише в серцевині вірусу);

3) НВeАг (відщеплюється від НВcorАг внаслідок проходження його через мембрану гепатоцитів).

Зараження відбувається при ін'єкціях інфікованої крові чи препаратів крові; через забруднені медичні інструменти, статевим шляхом та інтранатально, можливе внутрішньоутробне інфікування.

Місце первинної реплікації вірусу невідоме; розмноження у гепатоцитах спостерігають лише через 2 тижні після інфікування. При цьому реплікативний цикл не супроводжується смертю гепатоцитів. У другій половині інкубаційного періоду вірус виділяють із крові, сперми, сечі, фекалій та секрету носоглотки. Патологічний процес починається після розпізнавання вірусіндукованих антигенів на мембранах гепатоцитів імунокомпетентними клітинами, тобто обумовлений імунними механізмами.

Клінічні прояви варіюються від безсимптомної та безжовтяничної форм до тяжкої дегенерації печінки. Течія гепатиту В тяжче, з поступовим початком, тривалим інфекційним циклом, вищим рівнем летальності, ніж при гепатиті А. Можлива хронізація процесу.

Лабораторна діагностика:

1) виявлення вірусних антигенів імунофлюоресцентним методом; матеріал – фекалії, кров та біопсійний матеріал печінки;

2) серологічні дослідження включають визначення антигенів і антитіл за допомогою реагентів - НВsАг, НВeАг; антигенів до НВsАг, НВcorАг, НВeАг та IgM до НВcorАг;

3) визначення ДНК-полімерази.

Лікування: засоби специфічної лікарської терапії відсутні, лікування переважно симптоматичне.

Специфічна профілактика:

1) пасивна імунізація – вводять специфічний імуноглобулін (HBIg);

2) активна імунізація (рекомбінантні вакцини, одержані методом генної інженерії).

Імунізація показана всім групам ризику, включаючи новонароджених.

З книги Дивовижна біологія автора Дроздова І В

«Шкідливий» вірус У 1887 р. у Криму плантації тютюну вразила невідома хвороба: листя рослин покривалося складним абстрактним малюнком, що розтікалося по листку, немов фарба, що переливається з одного аркуша на інший, від однієї рослини до іншої. Сільське господарство

З книги Мікробіологія: конспект лекцій автора Ткаченко Ксенія Вікторівна

2. Вірус герпесу Сімейство Herpesviridae включає в себе підродини: 1) a-herpesviruses (I і II типів, герпес-зостер); 2) b-herpesviruses; 3) g-aherpesviruses. Належать до ДНК-вірусів. ДНК двониткова, лінійна. Геном складається з двох фрагментів: довгого та короткого. Нитка ДНК намотана на центральну

З книги Мікробіологія автора Ткаченко Ксенія Вікторівна

3. Вірус краснухи Належить до сімейства Togaviridae, роду Rubivirus. Середня величина рубівірусів – 60 нм. Поверхня вірусів покрита глікопротеїновими спікулами, що містять

З книги Фармацевтична та продовольча мафія автора Броуер Луї

1. Вірус поліомієліту Належить до сімейства Picornaviridae, роду ентеровірусів. Це відносно невеликі віруси з ікосаедральною симетрією. Середній розмір вірусних часток – 22-30 нм. Стійкі до дії жирових розчинників. Геном утворює несегментована молекула

З книги Таємні стежки носіїв смерті автора Даніел Мілан

ЛЕКЦІЯ № 26. ВІЛ (вірус імунодефіциту людини) 1. Структура ВІЛ відноситься до сімейства ретровірусів. Віріон має сферичну форму, діаметром 100-150 нм. Кубичний тип симетрії. Зовнішня (суперкапсидна) оболонка вірусу складається з бімолекулярного шару ліпідів, який

З книги Планета вірусів автора Циммер Карл

1. Вірус сказу Належить до сімейства Rhabdoviridae, роду Lyssavirus.Рабдовіруси відрізняють кулеподібна форма, наявність оболонки, спіральна симетрія; геном утворений РНК. Середні розміри віріона - 180? 75 нм; один кінець закруглений, інший плаский; поверхня випукла з кулястими

З книги Еволюція людини. Книга 2. Мавпи, нейрони та душа автора Марков Олександр Володимирович

1. Вірус гепатиту А Вірус гепатиту А відноситься до сімейства пікорнавірусів, роду ентеровірусів. Вірус гепатиту А з морфології схожий з іншими представниками роду ентеровірусів. Геном утворює однониткова молекула + РНК; він містить три основні білки. Не має

З книги У світі незримого автора Блінкін Семен Олександрович

49. Вірус герпесу. Вірус краснухи Вірус герпесу. Сімейство Herpesviridae включає в себе підродини: 1) a-herpesviruses (I і II типів, герпес-зостер); 2) b-herpesviruses; 3) g-aherpesviruses. Належать до ДНК-вірусів. ДНК двониткова, лінійна. Капсидна оболонка кубічний тип симетрії. Є

З книги автора

53. Вірус сказу. Флавівіруси Вірус сказу. Належить до сімейства Rhabdoviridae, роду Lyssavirus.Рабдовіруси відрізняють кулеподібна форма, наявність оболонки, спіральна симетрія; геном утворений РНК.Сказ – гостра інфекція ЦНС, що супроводжується дегенерацією нейронів

З книги автора

54. Вірус гепатиту А і В Вірус гепатиту А відноситься до сімейства пікорнавірусів, роду ентеровірусів. Вірус гепатиту А з морфології схожий з іншими представниками роду ентеровірусів. Геном утворює однониткова молекула + РНК. Не має суперкапсидної оболонки.

З книги автора

Чого вартий Службі соціального забезпечення вакцина проти гепатиту В (уривок з французького журналу «Positifs») Витрати на вакцинацію проти гепатиту В у Франції щорічно досягали від 1,1 до 1,2% загального бюджету Служби соціального забезпечення!

З книги автора

Вірус – тварина – людина Крок за кроком ми простежили довгий і складний шлях, яким вчені йшли до пояснення стосунків між вірусом Тягиня та комарами. Але це лише одна ланка (важлива, але не єдина) у тому ланцюгу, за яким у природі циркулює інфекція. Не менше

З книги автора

Погляд із зірок Вірус грипу Інфлюенца. Якщо заплющити очі і вимовити це слово вголос, воно звучить дуже мило. Так могло б називатися чарівне стародавнє італійське село. Слово «інфлюенца» і справді італійське, воно означає «вплив». Крім того, це

З книги автора

Новий американець Вірус Західного Нілу Влітку 1999 Трейсі Макнамара (Tracey McNamara) почала турбуватися. Макнамара була головним патологоанатомом у зоопарку Бронкса. Коли тварина в зоопарку вмирала, до її обов'язків входило виявлення причин цього. Вона помітила загиблих

З книги автора

Вірус мозку? На думку Річарда Докінза (2005), поширення комп'ютерних вірусів, звичайних біологічних вірусів та різних ідей (мемов), у тому числі всіляких забобонів, засноване на тому самому механізмі. "Егоїстичний" і зовсім не обов'язково приносить користь своєму

З книги автора

Вірус кору теж приборканий Про те, що кір є вірусною інфекцією, стало відомо 1911 р., але виділити вірус вдалося лише 1954 р. Десятки років продовжувалося вивчення методів культивування корового вірусу. Проблема вивчення пояснювалася особливими властивостями вірусу. Поза

Вірусний гепатит широко поширений у всіх країнах світу. Захворювання відрізняється винятково високим ступенем заразності, щорічно забирає життя сотні тисяч хворих, є величезною медико-соціальною проблемою. Вірус гепатиту В (НВV) вражає переважно печінку. Цироз органу та гепатоцелюлярна карцинома є грізними ускладненнями захворювання. Резервуаром і джерелом інфекції є хворі на гостру та хронічну форму захворювання, що протікають безсимптомно. Інфекційний потенціал вірусів (заразність) у 100 разів вищий за віруси імунодефіциту людини. Вони мають виражену здатність до мутацій, високої стійкістю і канцерогенністю. Збудники у великій кількості виявляються в крові та інших біологічних рідинах організму, що викликають тривалу вірусемію.

Передається гепатит багатьма шляхами, основними з яких є парентеральний (при переливанні крові або її компонентів) і при внутрішньовенному вживанні наркотиків. Для зараження достатньо 0,1 - 0,5 мкм. крові. Основним резервуаром інфекції є хронічні носії антигену HBs. Багатофакторність способів передачі, надзвичайно високий ступінь стійкості вірусів у зовнішньому середовищі та загальна сприйнятливість усіх груп населення до інфекції сприяють поширенню захворювання у всіх країнах світу. Близько 2 млрд. людей у ​​світі сьогодні мають ознаки контакту з вірусами гепатиту В. Понад 400 млн. з них є хронічно інфікованими, у 20 — 40% з них розвинеться цироз печінки або гепатоцелюрна карцинома. Від наслідків захворювання щорічно помирає понад 2 млн. хворих. Хороша імунна система призводить до лікування 90% інфікованих осіб. Як правило, хвороба набуває хронічного перебігу у осіб із вродженими та набутими імунодефіцитами.

Мал. 1. Цироз печінки – грізне ускладнення захворювання.

Історія відкриття збудника

У 1962 - 1964 роках В. Blumberg (американський лікар біохімік, вчений) при дослідженні сироватки крові корінного австралійця (аборігена) виявив незвичайний білок - прецепітуючий антиген, що асоціюється із захворюванням вірусного гепатиту (пізніше названий австралій) Нобелівська премія.

У 1968 році А. М. Prince цей білок виявив у сироватці крові людини, яка знаходилася в інкубаційному періоді захворювання, що розвинулося внаслідок переливання крові.

У 1970 році Д. Дейн виявив під електронним мікроскопом найдрібніші сферичні форми частки (частки Дейна), що виявилися збудниками інфекційного гепатиту - віруси гепатиту В.

Перша вакцина від захворювання була розроблена 1977 року в США.

Мал. 2. Барух Блумберг (1925 - 2010 р.р.) вперше пов'язав австралійський антиген з вірусом гепатиту В (не виділеним ще в той час), що послужило поштовхом до розробки ефективної вакцини.

Мікробіологія

Приналежність вірусу гепатиту В:

  • Сімейство Hepadnaviridae.
  • Вид Вірус гепатиту Ст.

У структурі геному міститься дезоксирибонуклеїнова кислота (ДНК).

Мал. 3. Віріони НВV мають округлу форму, на вигляд нагадують гранули.

НВV є найдрібнішим вірусом. Представлений 3-ма формами:

  • Частинки Дейна (віріони) мають антигенні властивості і виявляють виражену інфекційність. Вони мають сферичну форму. Діаметр становить 42 - 47 нм. Оточені подвійною ліпідно-білковою оболонкою. Ядро містить ДНК та ДНК-залежну полімеразу. Мають тропізм до тканини печінки.
  • Часто в сироватці крові виявляються частки, які не виявляють інфекційних властивостей. Вони не мають ядра. Одні мають сферичну форму (діаметр становить 22нм.), інші — ниткоподібну форму (розмір 22 х 50 — 230 нм.). За великого збільшення проглядається їх поперечна смугастість. Частинки формуються з відрізків поверхневого антигену (HBsAg) і виробляються надміру при реплікації вірусів.

Мал. 4. На фото нуклеокапсиди (НК) та частинки, що формуються з відрізків поверхневого (австралійського) антигену (HBsAg).

Будова вірусу гепатиту В

HBV складається з нуклеокапсиду, оточеного зовнішньою оболонкою. Має сферичну форму. Його діаметр становить від 40 до 48 нм.

Суперкапсид HBV

Зовнішня оболонка вірусу (суперкапсид) складається з ліпідів. Вона містить 3 глікопротеїни, або поверхневі антигени (Ag), включаючи найбільш активно продукований S-протеїн, відомий як HBsAg (поверхневий «австралійський» антиген). HBsAg при захворюванні продукується у величезній кількості. Його уривки — сферичні та ниткоподібні частинки присутні у крові навіть за відсутності віріонів у крові.

Капсид HBV

Капсид має форму ікосаедра, складається з 180 капсомерів (структурних білкових субодиниць). Його діаметр становить 27 нм. Нуклеокапсид містить ДНК і прикріплені до неї ДНК-полімеразу (зворотну транскриптазу) та протеїнкіназу.

Геном оточений core-білком - HBcAg (серцеподібний антиген). У структурі віріона знаходяться також ядерний HbcAg та його секретована частина HBeAg (антиген інфекційності), який виділяється в кров при реплікації вірусів та маловивчений HBxAg.

Мал. 5. Схема будови вірусу. 1 - ДНК-полімераза. 2 - ДНК. 3 - ядерний HBcAg. 4 - ядерний HBеAg. 5 — поверхневий HBsAg та його уривки (відрізки) у вигляді сферичної та ниткоподібної форми.

ДНК HBV

Молекула ДНК HBV має кільцеподібну форму, дволанцюжкова: один ланцюг повний - (-) нитка, другий меншої довжини (коротше на 20 - 30%) - (+) нитка. Довга нитка містить близько 3200 нуклеотидів, до неї приєднано молекулу полімерази. Коротка нитка містить 1700 - 2800 нуклеотидів. За реплікацію вірусних частинок та синтез білків відповідають регуляторні послідовності ДНК. Ген S ДНК кодує HBsAg, ген С - HBcAg, ген Р - полімеразу, ген Х - білок-регулятор експресії генів.

Мал. 6. На фото зліва вірусні частинки, що на вигляд нагадують гранули. Виразно видно зовнішні оболонки нуклеокапсидів. У 2-х із них зовнішня оболонка відсутня (вказано стрілками). На фото праворуч на зовнішній оболонці вірусів чітко видно утворення, що нагадують шипи.

Реплікація вірусу

Реплікація HBV (репродукція) відбувається у клітинах печінки – гепатоцитах. У результаті цього процесу у тому цитоплазмі утворюється дуже багато HBsAg. Білок надходить у кров, що фіксується методами лабораторної діагностики. Менш інтенсивно віруси реплікуються у клітинах підшлункової залози, нирок, лімфоцитах та кістковому мозку. HBcAg у сироватці крові практично не виявляються. Вони локалізуються у ядрах клітин. HBeAg (субодиниця HBcAg) проникає в кров. Його виявлення свідчить про активну реплікацію вірусів та їх високу резистентність. Реплікація вірусу малюнку нижче.

Мал. 7. Реплікація вірусу гепатиту В. 1 – проникнення вірусу в цитоплазму клітини. 2 — добудовування неповної нитки ДНК-генома та формування повної двониткової кільцевої ДНК. 3 - дозрівання геному та його проникнення в ядро ​​клітини. 4 - в ядрі клітинна ДНК-залежна РНК-полімераза починає продукувати різні іРНК (необхідні для синтезу білків) та РНК-прегеном (матриця для реплікації вірусного геному). 5 — Переміщення іРНК до цитоплазми клітини та їх трансляція з утворенням білків вірусу. Збір серцеподібних білків вірусу навколо прегенома. Синтез (-) нитки ДНК на матриці прегеном під впливом РНК-залежної ДНК-полімерази. 6 - утворення (+) нитки ДНК. 7 - формування оболонки віріона. Вихід віріону із клітини шляхом екзоцитозу.

Антигени вірусу гепатиту В

Антигени є чужорідними білками, при попаданні в організм, які викликають утворення антитіл. У ролі антигенів вірусу гепатиту В виступають австралійський (поверхневий) антиген HBsAg та два ядерні HBcAg та HBeAg.

Австралійський антиген (поверхневий) HBsAg

Австралійський антиген був відкритий американським вченим Барухом Блумбергом у 1964 році. Австралійським (стара назва) він був названий тому, що вперше був виявлений у сироватці крові корінного австралійця. HBsAg входить до складу суперкапсиду, продукується при захворюванні у величезній кількості вже з кінця інкубаційного періоду, зберігається в період жовтяниці та здебільшого зникає лише в період одужання. Його відрізки у вигляді сферичних і ниткоподібних частинок присутні в крові навіть за відсутності віріонів у крові, не мають інфекційних властивостей.

  • Поверхневий антиген складається з глікопротеїну та ліпіду. У його частках розрізняють 3 протеїни (пре-S1, пре-S2 і S), вуглеводний та ліпідний компоненти. Є також рецептор, чутливий до полімеразного альбуміну, який сприяє проникненню вірусу в клітину.
  • HBsAg адсорбується на мембранах гепатоцитів, їх багато в крові, вони присутні у сечі, спермі та слині хворих та здорових антигеноносіїв.
  • Австралійський антиген має відносно низьку імуногенність. Він здатний довго персистувати в організмі хворого.
  • HBsAg стійкий до детергентів (поверхнево-активні речовини), у тому числі протеаз (протеолітичних ферментів).
  • Існує кілька підтипів австралійського антигену (ayw, ayr, adr та adw). Їх розподіл різний різними територіях, що може бути відносним епідеміологічним маркером вірусного гепатиту У.

HВcAg (HBcorAg)

HВc антиген локалізується у ядрах гепатоцитів. Являє собою нуклеопротеїн. Його секретується є HВeAg, який утворюється в процесі перетворення білка precore в структурний білок core. Виявляється у біопатах печінки, у кров не секретується. Має виражену імуногенність. Є маркером реплікації вірусу. Виявляється методом ІФА.

HBeAg

HBe є ядерним антигеном. Є протеїном. Має імуногенність. Знаходження його у сироватці крові свідчить про інфекційність. Високий вміст антигену HBe в крові корелюється з підвищеним рівнем частинок Дейна і високим титром антигену HBs. Виявити HbeAg можна лише методом ІФА у цитоплазмі клітин печінки. Методом РІА Hbe антиген при захворюванні виявляється у сироватці крові у 100% випадків.

HВxAg

HВx антиген сьогодні є маловивченим. Вважається, що він відіграє певну роль у реплікації вірусів та розвитку гепатоцелюлярної карциноми – первинної злоякісної пухлини печінки (рак печінки).

Мал. 8. На фото віріони НВV сферичної форми у вигляді гранул і частинки, що не виявляють інфекційних властивостей, сферичної та ниткоподібної форми (відрізки HbsAg).

Генотип вірусу

В даний час виділено 10 генотипів вірусу гепатиту В: A, B, C, D, E, F, G, H, I та J. Їх визначення допомагає виявити зв'язок між джерелом інфекції та хворим, оскільки генотипи мають різний географічний розподіл. Генотипи відрізняються один від одного за нуклеотидною послідовністю в середньому на 8%. Найбільш поширеними та вивченими є генотипи A, B, C та D.

  • Генотипи HBV А та Д поширені повсюдно.
  • Генотип А найчастіше зустрічається в Європі, Росії, Південно-Східній Азії, Філіппінах та Африці. Підтип А1 - в Африці, Азії та Філіппінах, А2 - Європі та США.
  • Генотип В і С поширений у Японії та Південно-Східній Азії.
  • Генотип Д поширений на Близькому Сході, Індії та середземноморському регіоні.
  • Генотип Е поширений в африканських країнах, розташованих на південь від Сахари.
  • Генотип F поширений на Алясці, у Південній та центральній Америці
  • Генотип G зустрічається у вигляді спорадичних випадків у Німеччині, Франції та США.

Різні генотипи вірусів по-різному відповідають на лікування, мають різний вплив на печінку і тривалість захворювання. Так гепатит, викликаний вірусами генотипу В і С, часто протікає з пошкодженням печінки, генотипом А - добре виліковується противірусними препаратами.

Мал. 9. Жовтяниця у хворого на гепатит.

Стійкість НВV

Вірус гепатиту В відрізняється великою стійкістю:

  • Зберігає життєздатність протягом 4-х тижнів на різних поверхнях та в сухій крові на одязі.
  • Близько 5 годин зберігає активність при дії хлороформу та ефіру, 18 годин – при дії кислот (pH=2-3).
  • Витримує багаторазове заморожування та відтавання. Зберігає активність до 7 діб при висушуванні за температури 25°С.
  • Віруси інактивуються лише через 10 годин від моменту впливу t про 60, через 10 - 20 хвилин від моменту кип'ятіння, через 1 годину від моменту обробки сухим жаром.
  • При дії сучасних засобів дезінфікування вірус інактивується через 60 хвилин.
  • На устаткуванні та апаратурі медичного призначення віруси зберігаються кілька днів і навіть тижнів. У шприцах, забруднених інфікованою кров'ю, ДНК вірусу зберігається до 8 місяців.
  • HBsAg не руйнується на лезах бритв, манікюрних приладах, марлі, ваті, білизні, серветках та рушниках до 6 місяців.

Вбиває вірус автоклавування протягом 45 хвилин при t 120, стерилізація сухим жаром протягом 1 години при t 180, кип'ятіння протягом 30 хвилин, прогрівання протягом 10 годин при t 60.

Вірус руйнується у лужних середовищах. Згубно діють на HBV перекис водню, формалін, хлорамін та фенол.

Мал. 10. Асцит при цирозі печінки. На шкірних покривах видно множинні крововиливи.

Патогенез гепатиту В

При попаданні в організм людини вірус фіксується на клітинній мембрані. Далі проникає усередину клітини, де відбувається його реплікація. Ураження печінкової клітини відбувається не внаслідок прямої цитопатичної дії збудника, а внаслідок впливу цитотоксичних імунних комплексів за участю HLA (комплексу гістосумісності). Імунні комплекси (ІЧ) утворюються в результаті взаємодії вірусу та антитіл (Hbs Ag + AT). Вони спрямовані як на позаклітинно розташовані віруси, і на інфіковані клітини печінки.

Загибель печінкових клітин призводить до дистрофії органу та розвитку некротичних змін. Патологічний процес розвивається в центрах печінкових часточок та перипортально. Згодом розвивається фіброз органу та ураження жовчних ходів, що призводить до розвитку холестазу — зменшення надходження жовчі до 12-палої кишки.

Активізація прооксидантних та пригнічення антиоксидантних процесів призводить до набухання та набряку печінкових клітин, зміни їх рН, порушення процесів окисного фосфорилювання.

Подібність антигену вірусу з антигенами системи гістосумісності людини зумовлює виникнення аутоімунних («системних») реакцій: тиреоїдиту, синдрому Шегрена, ідіопатичної тромбоцитопенічної пурпури, гломерулонефриту, ревматоїдного артриту та ін.

Потужний гуморальний та клітинний імунітет у 90% випадків призводить до одужання. При слабкій клітинній ланці імунної системи процес набуває хронічного перебігу.

Мал. 11. Жирова дистрофія печінки при гепатиті.

Імунітет

Постінфекційний імунітет при гепатиті напружений і тривалий, не виключається, що довічний. Повторні випадки хвороби трапляються вкрай рідко. Тип імунітету гуморальний.

Мал. 12. На фото гепатоцелюлярна карцинома – грізне ускладнення вірусного гепатиту.

Поширеність захворювання

На показник поширеності гепатиту В впливають соціальні та економічні умови.

  • Несприятливими регіонами є Африка, Південно-Східна Азія, Західна частина Тихого океану (Філіпіни, Індонезія) та Китай, де частота HbsAg носійства досягає 10 - 20%. Найбільше інфікованих реєструється в регіонах, розташованих південніше Сахари.
  • Середній рівень носійства HBsAg (від 2 до 7%) відзначається у країнах Південної Америки, Східного Середземномор'я, Південної Європи, Середньої та Центральної Азії, Росії та країн СНД.
  • Низький рівень носійства HBsAg (від 0,01 до 0,5%) відзначається у країнах Північної Америки, Австралії та Західної Європи.
  • У Росії цей показник варіює від 8 до 10% у Якутії, Тиві та Північному Кавказі, від 4 до 5% – у Східному Сибіру та 1% – у європейській частині країни.

Мал. 13. Поширеність хронічного вірусного гепатиту.

Як передається гепатит В

Передача інфекції здійснюється багатьма шляхами, основними з яких є парентеральний – при переливанні крові, її компонентів та внутрішньовенному вживанні наркотиків. Лібералізація статевої поведінки призвела до підвищення кількості осіб, інфікованих вірусами гепатиту при статевих контактах. Велику частку хворих становлять особи, інфіковані у побуті. Для зараження достатньо 0,1 - 0,5 мкм. крові. Ризику зараження піддаються медичні працівники та хворі, які перебувають на гемодіалізі, наркомани, особи, які ведуть безладне статеве життя, що проживають у несприятливих житлово-побутових умовах. Множинність шляхів передачі забезпечує широку поширеність інфекції серед населення багатьох країнах світу. Сприяє цьому висока стійкість вірусів у зовнішньому середовищі та високий рівень сприйнятливості інфекції серед усіх груп населення. Збудник гепатиту В заразніший вірус імунодефіциту в 50 - 100 разів. У країнах із низьким рівнем соціально-економічних та санітарно-гігієнічних умов життя населення за відсутності широкого вакцинування HBV заражаються майже всі діти.

Джерело HBV-інфекції (резервуар збудників)

Джерелом HBV-інфекції є особи з безсимптомними та маніфестними формами захворювання. Хворі з хронічним активним вірусним гепатитом є основними джерелами інфекції протягом багатьох років і десятиліть. Ступінь інфекційної небезпеки залежить від активності патологічного процесу.

Віруси в крові інфікованих хворих з'являються за 2 - 8 тижнів до підвищення печінкових проб і циркулюють протягом усього гострого періоду та в період хронічного носійства, який формується у 5 - 10% випадків захворювання.

У світі налічується близько 400 млн. хворих на хронічні форми гепатиту В — носіїв HbsAg. Всі вони як джерела інфекції становлять реальну величезну загрозу. Їх ступінь заразності визначається за активністю патологічного процесу у печінці та концентрації антигенів вірусів у сироватці крові. Особливу небезпеку становлять особи з вродженим і набутим імунодефіцитом: які страждають на аутоімунну патологію, злоякісні новоутворення, хронічні захворювання паренхіматозних органів, особи, які отримують імуносупресивну терапію.

  • Хворі на гострий гепатит В становлять небезпеку протягом 45 - 60 днів інкубаційного періоду, 10 - 14 днів у період продрому і 14 - 21 день у стадії виражених клінічних проявів - всього приблизно 65 - 95 днів. У стадії одужання концентрація HbsAg різко знижується. Пацієнти, що заразилися від хворих на гострий гепатит В, залишають 4 - 6% всіх інфікованих.
  • Хворі з хронічним активним вірусним гепатитом більш заразні, ніж хворі з неактивною формою захворювання, первинним раком і цирозом печінки.

У інфікованих осіб HBV знаходяться у сироватці крові, менструальній крові, вагінальному секреті, спермі, сечі, калі, сльозах, слині, жовчі, грудному молоці, в асцитичній та амніотичній рідині, панкреатичному соку, плевральній та суглобовій рідині. Реальну небезпеку становить кров, сперма та слина хворої людини. В інших біологічних рідин концентрація збудників дуже мала.

Мал. 14. Жовтянична форма вірусного гепатиту. Шкірні покриви і склери очей набуває жовтяничного забарвлення.

Шляхи передачі інфекції

Кровоконтактний є основним механізмом передачі гепатиту.

Шляхи передачі інфекції поділяються на природні та штучні.

  • До природних шляхів поширення HBV відносяться: статевий, вертикальний (від матері до дитини), контактно-побутовий.
  • До штучних шляхів поширення HBV відносяться: лікувально-діагностичні процедури (ін'єкції, переливання крові, гемодіаліз, інвазивні дослідження, трансплантації), використання нестерильних шприців та голок наркоманами, пошкодження шкірних покривів та слизових оболонок при нанесенні татуювань, пірсин.

Парентеральний шлях передачі інфекції

Парентеральний шлях (переливання крові та її компонентів) раніше займав провідні позиції у структурі основних шляхів передачі інфекції (від 50 до 90%). Останніми роками цей показник у цивілізованих країнах знизився до кількох відсотків, що пов'язано із запровадженням обов'язкової процедури визначення HBsAg методом ІФА у донорів усіх категорій з подальшим усуненням здачі крові осіб із позитивними результатами обстеження. Сьогодні вперед виходять зараження гепатитом В при внутрішньовенному вживанні наркотиком та активізація статевого шляху розповсюдження захворювання.

Важливе значення має широке забезпечення лікувально-профілактичних установ інструментами та системами одноразового користування.

До групи ризику входять хворі, яким вводиться кров та плазма, що перебувають на гемодіалізі, онкологічні та гематологічні хворі, особи, яким проводилася трансплантація органів.

До групи підвищеного професійного ризику входять хірурги, стоматологи, онкологи, гематологи, акушери-гінекологи, трансфузіології, лаборанти та медичний персонал, що працюють з ними. Ця категорія осіб підлягає першочерговій імунізації. Медиків необхідно щепити ще до початку навчання, хворих — до вступу до гематологічного чи онкологічного стаціонару.

Мал. 15. Багато років зараження гепатитів В відбувалося в основному парентеральним шляхом (при переливанні крові та її компонентів). Але останніми роками першому плані виходять зараження при внутрішньовенному вживанні наркотиком і статеві шляхи поширення інфекції.

В останні роки відзначається значне зростання передачі гепатиту В при внутрішньовенному введенні наркотиків. Цей шлях передачі інфекції становить від 30 до 60% у структурі вперше інфікованих HBV із гострими формами захворювання. Зараження відбувається при користуванні загальними шприцами, голками та заборі наркотичних розчинів із загальних ємностей.

Мал. 16. Втрата моральних засад, алкоголізація, наркоманія та статева розбещеність є основними факторами передачі інфекції серед молодого покоління.

Інструментальний шлях передачі інфекції

Зараження гепатитом В може статися при використанні нестерильних інструментів, що застосовуються під час проведення лікувальних та діагностичних процедур, у процесі яких порушується або може порушитися цілісність шкірних покривів та слизових оболонок: стоматологічні процедури, інструментальні методи обстеження, ін'єкції, взяття крові на аналіз та ін. шлях зараження серед вперше інфікованих HBV становить 7 - 30%.

Інфекція може передаватися при використанні нестерильних інструментів, які застосовуються під час проведення косметичних процедур (гоління, педикюр, манікюр та ін.), пірсингу та татуювань.

Мал. 17. HBV-інфекція може передаватися під час використання нестерильних інструментів.

Передача гепатиту В від матері до дитини

Схильні до ризику зараження діти, народжені від інфікованих HBV матерів. У разі розвитку гострого гепатиту в 1 та 2 триместрах вагітності ризик інфікування плода невеликий, а у 3 триместрі зараження плода відбувається у 90% випадків.

Зараження плода відбувається при розриві плаценти та під час пологів. За статистикою на внутрішньоутробне інфікування плода припадає 5-10% випадків, на зараження плода під час пологів - 90-95% випадків. Гепатит у новонароджених протікає здебільшого безсимптомно, через що захворювання у них не діагностується.

Статевий шлях зараження

Останніми роками внаслідок лібералізації статевих відносин відзначається різке збільшення кількості випадків передачі HBV-інфекції статевим шляхом. У деяких країнах питому вагу випадків гострого гепатиту зі статевим шляхом передачі інфекції становлять 18 - 21%. До групи ризику входять повії та гомосексуалісти. Причиною поведінкового ризику серед молодого покоління є втрата моральних підвалин, алкоголізація та статева розбещеність.

Контактно-побутовий шлях зараження

Гепатит може поширюється всередині сім'ї та організованих колективах дорослих і дітей. Сприяю інфікуванню недотримання правил особистої та громадської гігієни, незадовільний утримання житла (квартир, гуртожитків, будинків для людей похилого віку, колоній, в'язниць, дитячих будинків та будинків інтернатів). У вогнищах хронічних носіїв інфекції захворювання контактних осіб відбувається у 10 – 86 % випадків. Віруси поширюються при використанні чужих зубних щіток, бритвенного приладдя, мочалок, рушників, масажерів та ін. Збудники в організм людини проникають через мікротравми на слизових оболонках та шкірних покривах.

Небезпеки зараження піддаються особи, які відвідують гіперендемічні за гепатитом країни та персонал, що доглядає дітей.

Вірус гепатиту В не передається при обіймах, рукостисканнях, чханні через столові прилади.

Мал. 18. Асцит у хворого на цироз печінки — грізне ускладнення цирозу печінки.

Діагностика гепатиту В

Гепатит є потенційно небезпечним для життя людини. Хворі з хронічними формами схильні до високого ризику розвитку цирозу печінки та первинного раку печінки (гепатоцелюлярної карциноми). Своєчасна діагностика захворювання дозволяє призначити адекватну етіотропну та патогенетичну терапію. В даний час існує низка аналізів крові для діагностики гострих та хронічних форм інфекції, оцінки поточного стану хворого та визначення прогнозу захворювання.

  • Лабораторна діагностика гепатиту В сьогодні зосереджена на виявленні HbsAg (поверхневого антигену, австралійського антигену). Обстеження всієї донорської крові на HbsAg забезпечило її безпеку при подальшому використанні даного біологічного матеріалу.
  • Мікробіологічна діагностика ґрунтується на ідентифікації вірусу та виявленні імунної відповіді на нього.
  • Для визначення тактики та прогнозу хвороби проводиться ПЛР на гепатит В (ПЛР ДНК HBV) – кількісний тест та генотип вірусу.
  • "Золотим стандартом" у діагностиці гепатитів є біопсія печінки.
  • Гістологічне дослідження біопсійного матеріалу дозволяє встановити нозологічну форму (гепатоз або гепатит), вираженість запального процесу та фіброзу органу.
  • Обов'язковим при обстеженні хворого з підозрою на гепатит є дослідження сироватки крові на наявність вірусів гепатиту С, D і ВІЛ, виявлення супутньої патології.

АЛТ та АСТ при гепатиті В

Оцінити тяжкість ураження печінки можна за рівнем у сироватці крові печінкових ферментів. Особлива увага приділяється ферменту АЛТ, який під час захворювання підвищується в 1,5 — 2 разу. Активність АСТ дещо нижча. Зворотне співвідношення спостерігається при прогресуванні хвороби та розвитку цирозу печінки. Рівень амінотрансфераз залишається в нормі у хворих у фазі імунної толерантності, неактивного носійства та у частини хворих з HBeAg-негативним хронічним гепатитом.

Обов'язковим для оцінки виконання основних функцій печінки є контроль таких біохімічних показників як g-глутамілтранспептидаза (g-ГТ), лужна фосфатаза, білірубін, альбумін плазми та глобуліни, протромбіновий час.

Зниження рівня альбуміну, підвищення g-глобулінів та подовження протромбінового часу (часто супроводжується зниженням числа тромбоцитів) є характерними ознаками цирозу печінки. Зниження рівня протромбінового індексу нижче 40% свідчить про критичний стан хворого.

Мал. 19. Грізний наслідок вірусних гепатитів – цироз печінки (макропрепарат).

ПЛР на гепатит В (ПЛР ДНК HBV)

ДНК HBV ПЛР – перший діагностичний маркер захворювання. ДНК вірусів з'являються у сироватці крові вже через 4 тижні від початку розвитку хвороби, HbsAg – через 2 – 8 тижнів. Метод має високу точність, специфічність і чутливість. Показник прийнято виражати МО/мл. Якщо результат виражений у копіях, значення в МЕ/мл ділиться на «5». Кількісний аналіз дозволяє оцінити ступінь вірусного навантаження і застосовується для оцінки ефективності лікування.

При зараженні мутантними штамами HBV (по precore-області геному) секреція HВeAg порушується і єдиним методом у такому разі, що підтверджує реплікацію вірусів, залишається ПЛР ДНК HBV.

Мал. 20. ДНК HBV ПЛР – перший діагностичний маркер захворювання.

Біопсія печінки

"Золотим стандартом" у діагностиці гепатитів є біопсія печінки. Гістологічне дослідження біопсійного матеріалу дозволяє встановити нозологічну форму (гепатоз або гепатит), вираженість запального процесу та фіброзу органу. За наявності клінічних ознак цирозу або за обов'язкового призначення противірусного лікування, незалежно від ступеня фіброзу/цирозу, біопсія не проводиться.

Мал. 21. Біопсія печінки - "золотий стандарт" діагностики гепатитів.

Антигени

Антигени є чужорідними білками, при попаданні в організм, які викликають утворення антитіл. У ролі антигенів вірусів гепатиту В виступають австралійський (поверхневий) HBsAg і два ядерних (серцевих) HBcAg та HBeAg. Для виявлення антигенів використовується імуноферментний аналіз (ІФА).

HBsAg (поверхневий, австралійський антиген)

HbsAg (білок) є маркером інфікованості вірусами гепатиту В. Його величезна кількість утворюється у цитоплазмі інфікованих клітин. Знаходження даного антигену у сироватці крові фіксується методами лабораторної діагностики. HbsAg має 2 поліпептидні фрагменти. Один із них фрагмент preS має імуногенні властивості (викликає утворення антитіл, використовується для приготування вакцин), другий — фрагмент preS2 (пооліглобуліновий рецептор, що сприяє адсорбції HBV на гепатоцитах).

  • HbsAg починає визначатися в сироватці крові хворого в гострий період через 2 - 8 тижнів після зараження (ще в кінці періоду інкубації), визначається в безжовтяничний і жовтяничний періоди і далі зникає в період одужання, що відбувається через 2 - 6 місяців у разі успішного завершення захворювання . Зниження концентрації антигенів у сироватці крові відбувається під впливом імунних реакцій.
  • При важких формах гепатиту поверхневі антигени в сироватці крові визначаються в період появи перших симптомів жовтяниці.
  • Реєстрація HbsAg більше 6 місяців вказує на хронізацію інфекційного процесу, що спостерігається у 10 - 20% хворих.

HBcorAg (HBcAg)

Серцевий HBcorAg (нуклеопротеїн) локалізується тільки в ядрах гепатоцитів. HBcorAg вказує на реплікацію вірусів, має виражену імуногенність.

Даний вид антигенів виявляється тільки в біоптатах печінки та аутопсійному матеріалі, у кров не секретуються. p align="justify"> Секретованою частиною HBcorAg є HВeAg, який утворюється в процесі перетворення білка precore в структурний білок core.

HВeAg

HBeAg (ядерний антиген) вказує на активну реплікацію вірусу та високий рівень інфікованості крові хворого. З'являється паралельно з HbsAg в сироватці крові в гострий період хвороби вже з кінця інкубаційного періоду, існує протягом короткого часу, оскільки елімінуються під впливом антитіл, що утворюються, що вважається гарною прогностичною ознакою. У разі мутації вірусів ядерний HbeAg відсутній.

HBxAg

HBxAg є найменш вивченим. Припускають, що їхня присутність вказує на злоякісну трансформацію печінкових клітин.

  • Для гострого гепатиту В характерна поява в сироватці крові Hbs-антигену та антитіл IgM до HBcAg (ядерного антигену). Поява антитіл у ядерному HBe-антигену вказує на високий рівень реплікації вірусу гепатиту В (HBV) та є маркером високої інфекційності хворого.
  • При хронічному гепатиті відзначається стійка (не менше 6-ти місяців) присутність HbsAg. Цей антиген у цей період є маркером ризику хронізації процесу.

Мал. 22. Нуклеокапсиди (НК) та частинки, що формуються з відрізків поверхневого (австралійського) антигену HBsAg.

Антитіла

Імунна відповідь організму інфікованої людини проявляється виробленням антитіл на певні антигени патогенного мікроорганізму. При гепатиті виробляються антитіла проти таких антигенів, як HBcAg, HBeAg і HbsAg. Поява антитіл (сероконверсія) говорить про сприятливу течію інфекційного процесу.

Антитіла до поверхневого антигену (Анти-HBs, anti-Hbs)

Аnti-Hbs з'являються у сироватці крові хворого після зникнення Hbs-антигенів через 2-6 місяців. Відсутність антитіл Аnti-Hbs пояснюється активним зв'язуванням з антигенами HВsAg. У ряді випадків відзначається період, коли в крові немає антигенів, ні антитіл (період серологічного вікна).

  • Як тільки в сироватці крові починають реєструються лише антитіла до поверхневого антигену Аnti-Hbs, говорять про формування імунітету проти HBV.
  • За наявності клінічних симптомів захворювання та негативних результатів HВsAg наявність антитіл є важливим діагностичним маркером інфікування.
  • Імуноглобуліни класу IgM свідчать про гостру стадію або загострення хронічного гепатиту. Вони визначаються протягом 1 - 2 місяців. Імуноглобуліни класу IgG з'являються на стадії одужання та присутні у сироватці крові після одужання багато років.
  • Затримка вироблення антитіл або їх відсутність говорить про слабку імунну відповідь та хронізацію процесу.
  • Виявлення в сироватці крові тільки Аnti-Hbs вказує на перенесене захворювання, що раніше мало місце.
  • Антитіла до фрагментів HbsAg preS1- та preS2 є протективними (вказують на розвиток постінфекційного або поствакцинального імунітету).

Антитіла до HВcAg (Анти-HBcor IgМ та IgG)

Антитіла до ядерного антигену НВС IgM є найбільш інформативними і надійними маркерами гострої інфекції або активації хронічної форми інфекційного процесу поряд з HbsAg. Вони виявляються паралельно з HbsAg вже з кінця інкубаційного періоду і зберігаються протягом усього періоду клінічних проявів гепатиту В і навіть у деяких випадках зберігаються в сироватці крові у вигляді слабопозитивної відповіді протягом наступних 1 - 2 років. Їх зникнення говорить про санацію організму, або розвиток інтегративної фази захворювання.

Антитіла до ядерного антигену НВС IgG після елімінації вірусів зберігаються в сироватці крові багато років. Захисту функції не виконують. Їх наявність вказує на поточну інфекцію або хворобу, перенесену в минулому. У хворих на хронічний гепатит поява антитіл до HВcAg (HBcorAg) IgG свідчить про завершення захворювання.

Антитіла до HВеAg (Анти-HВеAg)

Антитіла до HВеAg з'являються в стадії одужання і в ряді випадків зберігаються протягом 10 - 20 років (іноді більше) після гострого перенесеного гепатиту В.

Мал. 23. Антитіла виробляються клітинами імунної системи хворого у відповідь антигени збудника. Чим вище імунна відповідь, тим більша концентрація антитіл у сироватці крові.

Основні маркери вірусного гепатиту В (таблиця)

Періоди захворюванняОсновні маркери вірусного гепатиту В
Інкубаційний періодПЛР на гепатит В – перший діагностичний маркер захворювання. Реакція стає позитивною вже через 4 тижні від початку захворювання.
HbsAg починають визначатись у сироватці крові хворого у гострий період захворювання – через 2 – 8 тижнів після зараження (ще наприкінці періоду інкубації), визначаються у безжовтяничний та жовтяничний періоди і далі зникає у період одужання, тобто через 2 – 6 місяців у разі успішного лікування.
До кінця періоду інкубації у сироватці крові можна виявити HbeAg та Анти HBcor IgM.
Гострий періодУ гострий період основними маркерами інфекції є HbsAg та HBeAg, а також Анти-HBcor IgM, ДНК HBV та ДНК-полімераза.
За відсутності у сироватці крові хворого HbsAg діагноз встановлюється на підставі виявлення антитіл класу М: Анти-HBcor IgM та Анти-HBе IgM.
При важких формах гепатиту В сироватці крові HbsAg визначається з появою перших симптомів жовтяниці.
↓Т-лімфоцити, ↓Т-супресори,Т-хелпери.

При розвитку холестатичного синдрому біохімічний синдром холестазу (+).

У гострий безжовтяничний період АЛТ.
Період реконвалесценції(+) аналіз на антитіла HBcIgG та HBeIgG. Через 1 - 3 міс. від початку захворювання починається нормалізація АЛТ.
Хронізація процесуПро хронізацію процесу свідчить тривала (понад 6 міс.) персистенція антигенів: HBsAg та HbeAg.
Лікування хронічного гепатиту ВУ хворих на хронічний гепатит поява антитіл HВcAg IgG свідчить про завершення захворювання.
Перенесена в минулому інфекціяМаркер перенесеного раннього захворювання є виявлення антитіл НВс IgG та Анти-НВs.
Носій HBV (раніше лікований гепатит або реакція на вакцину проти гепатиту В).Виявлення анти-HBs.

Мал. 24. Цироз печінки – вкрай несприятливий результат хронічної форми захворювання.

Не працює

Вам також може сподобатися